A dihidromiricetin alapjai

A dihidromiricetin egy erős dihidropirimidáz inhibitor, IC50-értéke 48 μM. A dihidromiricetin az mTOR jelátvitel gátlásával aktiválja az autofágiát. A dihidromiricetin gátolja az mTOR komplex (mTORC1/2) képződését.

Cél: Dihidropirimidináz: 48 μM (IC50);mTORC1;mTORC2;Autofágia

In vitro vizsgálatok: A dihidromiricetin, egy flavonol, jelentősen gátolja a dihidropirimidáz katalitikus aktivitását atermészetes szubsztrát dihidrouracil és xenobiotikus szubsztrát 5-propil-hidantoin. A dihidromiricetin mindkét szubsztrátumon szignifikáns gátló hatást mutatott a dihidropirimidáz aktivitására, még jobban, mint a miricetin. A dihidropirimidáz dihidropirimidáz dihidromiricetinjének IC50-értéke, amelyet a dihidrouracil és a 5-propilhidantoin titrálási görbéivel határoztak meg, 48±2, illetve 40±2 μM volt[1]. A dihidromiricetin (DHM) kiegészítése jelentősen megfordította az mTOR foszforiláció növekedését a Ser2448-nál (p-mTOR) a D-gal beadása során, ami arra utal, hogy a dihidromiricetin aktiválhatja az autofágiát az mTOR jelátvitel gátlásával.

In vivo vizsgálat: A normál kontrollcsoportot, a D-gal csoportot, a D-gal plusz dihidromiricetin (100 mg/kg) csoportot, a D-gal plusz dihidromiricetin (200 mg/kg) csoportot Morris vízi labirintus (MWM) segítségével értékelték. patkányok tanulási és memóriaképessége) (n=10 csoportonként). A dihidromiricetin (DHM) kezelés jelentősen lerövidíti a szökési késleltetést a D-gal-indukált modellcsoporthoz képest.

Oldhatóság: In vitro: DMSO: 100 mg/mL (312,26 mM) vagy annál nagyobb, "Nagyobb vagy egyenlő" azt jelenti, hogy oldható, de a telítettség nem ismert. In vivo: 1. Adjon hozzá minden oldószert egyesével: 10 százalék DMSO 90 százalék (20 százalék SBE- -CD sóoldatban) Oldhatóság: 2,5 mg/ml (7,81 mM) vagy annál nagyobb; tiszta oldat 2. Adjon hozzá egyenként minden oldószert: 10% DMSO 40% PEG300 5% Tween-80 45% Sóoldat Oldhatóság: 2,5 mg/ml (7,81 mM) vagy annál nagyobb; Tiszta oldat 3. Adjon hozzá minden oldószert egyenként: 10% DMSO 90% kukoricaolaj Oldhatóság: nagyobb vagy egyenlő, mint 2,5 mg/ml (7,81 mM); tiszta oldat.

Raktári megoldás:

1 mM 3,1226 ml 15,6128 ml 31,2256 ml

5 mM 0,6245 ml 3,1226 ml 6,2451 ml

10 mM 0,3123 ml 1,5613 ml 3,1226 ml

Kináz vizsgálat: Gyors spektrofotometriás vizsgálatokat használnak a hidantoináz, allantoináz, dihidrotirozináz és imináz enzimaktivitásának meghatározására. Szubsztrátként dihidrouracilt, {{0}}propil-hidantoint és ftálimidet használtak. Hacsak kifejezetten másként nem jelezzük, a dihidropirimidáz standard vizsgálatában dihidrouracilt (2 mM) használtunk szubsztrátként. Röviden, az abszorbancia csökkenését 23{17}}, 248 és 298 nm-en mértük a dihidrouracil, a 5-propil-hidantoin és a ftálimid, mint szubsztrát hidrolízisekor 25 fokon. A reakció elindításához tisztított dihidropirimidázt (10-70 ug) adtunk 2 ml szubsztrátot és 1 00 mM Tris-HCl-t (pH 8.{36}}) tartalmazó oldathoz. ). A szubsztrátum hidrolízisét UV/vis spektrofotométerrel követtük. Az egyes szubsztrátumok extinkciós együtthatóját kísérletileg, spektrofotométerrel végzett közvetlen méréssel határoztuk meg. A dihidrouracil, a 5-propil-hidantoin és a ftálimid extinkciós együtthatója 230 nm-en 0,683 mM-1 cm-1, 248 nm-en pedig 0,0538 mM-1 cm-1 , illetve 0,0538 mM-1 cm-1 298 nm-en, illetve 3,12 mM-1cm-1. A változás kezdeti sebessége a 0.01-0.18 perc μmol szubsztrát percenként, és a fajlagos aktivitás mértékegységben van kifejezve az enzim mg-jára vonatkoztatva. A Km és Vmax kinetikai paramétereket nemlineáris diagramokból határoztuk meg úgy, hogy az egyes kísérletek hidrolízissebességeit a Michaelis-Menten egyenlethez illesztettük.

Sejtkísérletek: A hippocampális és kortikális szövetmintákat 20 mM Tris-t (pH 7,5), 135 mM NaCl-t, 2 mM EDTA-t, 2 mM DTT-t, 25 mM glicerofoszfátot, 2 mM nátrium-pirofoszfátot, 10%-os nátrium-pirofoszfátot tartalmazó lízispufferben lizáltuk. Triton X homogenizálás. -100, 1 mM nátrium-ortovanadát, 10 mM NaF, 10 ug/ml aprotinin, 10 ug/ml leupeptin és 1 mM PMSF jégen 30 percig, majd 12000 xg-vel, 4 fokon 30 percig centrifugáljuk. A felülúszót összegyűjtöttük, és a fehérje mennyiségi meghatározását a BCA kit segítségével végeztük. A fehérjemintákat 5 percig forraltuk 95 fokon mintapuffer jelenlétében. A célfehérjéket nátrium-dodecil-szulfát poliakrilamid gélelektroforézissel (SDS-PAGE) választottuk el, nitrocellulóz membránokra vittük át, és a megfelelő primer és szekunder antitestekkel vizsgáltuk. Végül, a megcélzott fehérjét fokozott kemilumineszcenciás (ECL) reagensekkel röntgenfilmnek való kitétellel jelenítse meg.

Állatkísérletek: Patkányok 40 hím Sprague-Dawley (SD) patkányt (életkor: 8 hetes; testtömeg: 160±20 g) használtunk. A patkányokat véletlenszerűen 4 csoportra osztották, beleértve a normál kontrollcsoportot, a D-gal modellcsoportot és a D-gal-t DHM-mel kombinálva, 100, illetve 200 mg/kg-d dózissal, mindegyikben 10 patkánnyal. csoport. Minden patkányt 22 ± 2 fokos szobahőmérsékletű és sötét fényperiódusú (12 óra:12 óra) környezetben tartottunk, ahol ad libitum volt hozzáférni táplálékhoz és vízhez. Az új környezethez való 1 hét szoktatás után a DHM csoport patkányainak szondán keresztül adtuk be a jelzett dózisú DHM-et desztillált vízben oldva, naponta egyszer reggel 8:00-kor 6 egymást követő héten keresztül. A normál kontrollcsoport patkányait desztillált vízzel adagoltuk. A normál kontrollcsoport kivételével a többi csoport patkányait szubkután injektáltuk D-gal-lal 150 mg/kg/nap dózisban 6 egymást követő héten keresztül. A DHM minden beadását 2 órával a D-gal injekció előtt kell beadni.

Szállítás: szobahőmérséklet; változhat

98 százalék

1.Gyors szállítás.Minőségbiztosítás

2. K+F csapatunk posztdoktori, biológiai és élelmiszeripari végzettségűekből áll, akik független K+F-képességekkel rendelkeznek.

3. Személyre szabott csomagolási szolgáltatás nyújtása. OEM szolgáltatás, beleértve a következőket: lágyzselé, kapszula, tabletta, tasak, granulátum stb. Ügyfélspecifikus termékek előállítását szolgálja világszerte több mint 100 ügyféllel.

4. Több mint 10 éves tapasztalattal rendelkezik a herballngrents GMP szabvány szerinti gyártásában. Teljes körű tapasztalat a gyógynövénykivonatok minőség-ellenőrzése és alkalmazása terén.